血液中血清蛋白及其他球蛋白的分離原理

實(shí)驗(yàn)原理

帶電質(zhì)點(diǎn)在電場作用下，帶正電荷的移向負(fù)極，帶負(fù)電荷的移向正極，這種現(xiàn)象稱為電泳。蛋白質(zhì)分子具有許多可解離的酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán)，在一定的pH條件下，它會(huì)解離而帶電，在某一pH下，蛋白質(zhì)分子中所帶的正電荷數(shù)恰好等于負(fù)電荷數(shù)，即分子靜電荷等于零。此時(shí)蛋白質(zhì)分子在電場中不移動(dòng)，溶液的這一PH值稱為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。

當(dāng)溶液的pH小于該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，則蛋白質(zhì)分子會(huì)結(jié)合一部分H離子而帶正電荷，在電場中就會(huì)向負(fù)極移，反之，如果溶液的pH大于該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，則蛋白質(zhì)分子會(huì)解離出一部分H離子而帶負(fù)電荷，在電場中就會(huì)向正極移動(dòng)。

由于各蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同，在相同的pH溶液中所帶的電荷性質(zhì)不同，電荷的數(shù)目不同，因而在電場中泳動(dòng)的方向和速度也不相同，從而使混合樣品中的蛋白質(zhì)各組分得到分離。

本實(shí)驗(yàn)采用的醋酸纖維薄膜電泳是以醋酸纖維薄膜為支持物。醋酸纖維薄膜對(duì)蛋白質(zhì)樣品吸附極少而無“拖尾”現(xiàn)象。

本方法快速省時(shí)、靈敏度高、樣品用量少、操作簡單，目前已廣泛用于分析檢測(cè)血漿蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎兒甲種球蛋白、體液、脊髓液、脫氫酶、多肽、核酸及其他生物大分子，為心血管病，肝硬化及某些癌癥鑒別診斷提供了可靠的依據(jù)，因而已成為醫(yī)學(xué)和臨床檢驗(yàn)的常規(guī)技術(shù)。